Jak se provádí cytologie u psa?

Cytologie ve veterinární medicíně. Cytologické vyšetření stěrů otisků prstů

Aby bylo možné určit účinnost zvolené léčebné metody a posouzení imunologických sil těla a regeneračních procesů v ráně se provádí cytologické vyšetření stěrů otisků prstů z povrchu rány. Zhotovení a analýza otisků povrchu rány je technicky jednoduchá, proveditelná za jakýchkoli podmínek a poměrně objektivní metoda studia procesu rány. Systematické studium otisků odhaluje dynamiku morfologických změn exsudátu rány a povrchové vrstvy granulační tkáně; odrážejí reaktivní, imunobiologické síly těla a regeneračně-zánětlivé procesy probíhající v ráně. Metoda otisků prstů nám umožňuje posoudit intenzitu boje těla s infekcí a dynamiku čištění ran od mikrobů a nekrotické tkáně.

Cytologický rozbor otisky prstů pomáhají určit fázi procesu rány a mohou být použity k hodnocení chirurgického zákroku, úspěšnosti medikamentózní léčby a také k objasnění indikací a kontraindikací pro budoucí chirurgický zákrok. Cytologická analýza otisků je však pouze doplňkovou metodou pro studium procesu rány a měla by být prováděna ve spojení s jinými metodami pro studium postižených zvířat.

Metoda otisků prstů z povrchu rány, poprvé navržený Pokrovskou a Makarovem a vylepšený v roce 1973 A. N. Golikovem, spočívá v tom, že otisky jsou vytvářeny přímo z povrchu rány a spolu s buňkami exsudátu rány i buňkami nově vytvořené granulace se v nich nachází tkáň.

Technika tisku. Otisky pomocí sklíčka. Před zhotovením otisku opatrně odstraňte z povrchu rány exsudát sterilním gázovým tamponem navlhčeným izotonickým roztokem chloridu sodného (suchý tampon i při lehkém dotyku často poškozuje granulační tkáň, zejména v prvních dnech po jejím vytvoření ). Poté kolmým dotykem povrchu rány sklem sterilním a odmaštěným v alkohol-etheru se na ní získá otisk. V tomto případě není povolen silný tlak sklem na povrch rány a posuvné pohyby, protože jinak dojde k deformaci buněk.

Postupně se odebírá 4-5 otisků ze stejné oblasti rány. V první oblasti převažují buňky ranného exsudátu a hnisavého detritu. Následné otisky, zejména poslední dva, obsahují buňky a mikroby umístěné na povrchu rány, včetně proliferativních buněk (povrchová vrstva granulační tkáně), které mají největší diagnostickou hodnotu.

Vytiskne se by měly být odebrány z co největšího povrchu nebo z několika oblastí rány, protože regenerační procesy a distribuce buněk po povrchu rány jsou nerovnoměrné a někdy opačné.

Tiskne pomocí vaty. Před pořízením otisku se z povrchu kanálu rány odstraní krev, hnis a další exsudát. Chcete-li získat otisk rány, vyjměte pomocí pinzety sterilní vatový tampon ze zkumavky s fyziologickým roztokem a vložte jej do kanálku rány, dokud nepřijde do kontaktu s biologickou tkání. Poté se tampon současně přiloží na podložní sklíčko.

Výsledné tisky se musí rychle usušit na vzduchu a fixovat v ethyl nebo metylalkoholu po dobu 5 minut nebo alkoholetheru (ve stejných částech) po dobu 15 minut. Fixní otisky, pyoflorogramy, ale i krevní nátěry se barví podle Romanovského-Giemsy (azur-eosin se zředí destilovanou vodou 1:10, nátěr se umístí do Petriho misky na skleněné tyčinky potiskem dolů a barvivo se nalité). Otisky z povrchu čerstvých ran by měly být natřeny 45-60 minut a z povrchu granulujících ran 1-1,5 hodiny Po obarvení se nátěr omyje destilovanou vodou.

Po opravě otisku prstu Na zadní stranu sklenice si voskovou tužkou vyznačte datum a číslo anamnézy. Takto zhotovené otisky se zkoumají pod mikroskopem.